ANALIZADORES


FACSCalibur

En nuestras instalaciones disponemos de un analizador FACSCalibur de Becton-Dickinson, para el análisis de muestras celulares que consiste en un sistema fluídico cerrado, pudiendo emplearse en el estudio de muestras biopeligrosas, tales como células sanguíneas humanas, siempre y cuando sean manipuladas con las precauciones apropiadas y la autorización pertinente.

Éste es un instrumento de utilización sencilla . En el IDIBAPS se anima a que el propio investigador sea a la vez el propio operador (ver la sección de aprendizaje). La Unidad mantiene un sistema de reserva horaria por vía telefónica con anticipación para la adquisición y/o análisis de las muestras.

Utiliza excitación mediante láser de argón refrigerado por aire de 15 mW, con una longitud de onda de emisión a 488 nm. Además incorpora un segundo diodo láser rojo de emisión a 635 nm. La disposición espacial y óptica de ambos láseres permite una excitación dual y la detección libre de contaminación de fluorescencias de un haz respecto del otro. A manera de un sencillo "cell sorter", este instrumento permite separar células en diferentes contenedores en función de sus características. La muestra consumida puede ser recogida para posteriores estudios o para cultivos celulares, o bien descartada durante el análisis. Tiene cuatro detectores de canales de fluorescencia, y está equipado con los filtros de paso de banda para emisiones de 530 nm (FITC), 585 nm (PE/PI), 661 nm (APC), y >670 nm (PerCP, PECy5). Como ejemplos de los fluorocromos más utilizados podemos mencionar la fluoresceína, la ficoeritrina o el yoduro de propidio.

Estos instrumentos analizan suspensiones celulares a razón de varios cientos de células por segundo, y comúnmente son analizadas entre 5,000 y 20,000 células por muestra. Los datos son almacenados en los discos duros de la estación de datos correspondiente, para ser analizados con posterioridad mediante el software especifico. Los datos acumulados por cada investigador pueden ser transferidos al servidor a través del sistema de red local, siendo por tanto accesibles desde cualquier ordenador de la Institución. Tenemos a disposición de los investigadores un excelente software para el análisis de los datos compatible con Macintosh y PC.